Kayıtlar

kronik myeloid lösemi etiketine sahip yayınlar gösteriliyor
Loading

SÜSPANSE HÜCRE KÜLTÜRÜ

Resim
Bugün sizlere süspanse hücre kültürünü anlatacğım. Öncelikle hücrelerimiz K562 ve sağlıklı hücreler. K562,kronik myeloid lösemi hücre hattıdır. Hücreler süspansedir ve yuvarlaktır. Bcr/abl füzyon geni için pozitiftir ve hem farklılaşmanın granülositlere  hem de eritrositleri proteomik olarak benzerlik taşımaktadır. Bu hücreler adeziv/adherent hücre olmdıkları için tripsine ihtiyaç duymadan herhangi bir kimyasal ve fiziksel etkiye bağlı kalmadan kolayca 50ml falcın tüplerimize aktarıyoruz.  -1200rpm 5dk santrifüjlüyoruz daha sonra süpernatant atılır, Pelet kısmı daha iyi kalkması için pıt pıtlanır. -Hücrelern olduğu 50ml falcon tüplerine 1 ml veya peletin durumuna göre 2-3 ml %10 RPMI (ortam ) ekliyoruz. İyice pipetaj yapıyoruz hücreler eşit bir şekilde dağılmasını sağlıyoruz - hücre sayımına geçiyoruz hücreleri 96 well plate bir kuyucuğuna 50ul hücre+50ul tripan blue ekliyoruz. Hücrelerimizi ışıklı mikroskop altında thoma lamında sayıyoruz  N x DF x 10.000 =1 ml deki hücre sayısını ver
ΔΔCt Hesaplama

ΔΔCt Hesaplama











ΔΔCt Sonucu: